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¿Cómo preparo un gel de poliacrilamida desnaturalizante?
2. Prepare un gel de poliacrilamida desnaturalizante como se describe en Electroforesis de ARN en gel de poliacrilamida (Rio et al. 2010). Coloque el gel en la caja de gel, agregue tampón de electroforesis TBE (diluido a 1×) a los depósitos superior e inferior y haga funcionar previamente el gel durante 15 a 45 minutos a un máximo de 1500 V/45 mA.
¿Qué es la electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE)?
La electroforesis en gel de poliacrilamida preparativa (PAGE) es una herramienta poderosa para purificar muestras de ARN. La electroforesis en gel de poliacrilamida desnaturalizante permite la separación de ácidos nucleicos que difieren en un solo nucleótido en longitud.
¿Cómo se extrae el ARN de un gel de poliacrilamida?
Descripción general El ARN se extraerá del gel utilizando el método de "trituración y remojo" (consulte también Purificación de oligos de ADN mediante electroforesis en gel de poliacrilamida desnaturalizante (PAGE)). 8.2. Duración
¿Cómo funciona el gel de poliacrilamida?
El gel de poliacrilamida se vierte entre dos placas de vidrio separadas por dos espaciadores delgados de teflón o nailon. Un llamado peine de dientes de tiburón o, con menos frecuencia, un peine ranurado estándar forma los pocillos de muestra en los que se cargan las muestras de ARN antes de la electroforesis.