El uso de un detergente zwitteriónico en la electroforesis en gel bidimensional de microsomas de hígado de trucha, 1983, Anal. Biochem., v. 135, 453-455 Schupbach, J., et al., Un método universal para la electroforesis en gel de poliacrilamida bidimensional de
gel. Dependiendo del tamaño del pocillo y del espesor del gel, la cantidad de proteína cargada debe oscilar entre 0,5 y 4,0 µg para muestras purificadas y entre 40 y 60 µg para muestras crudas si se utiliza una tinción con azul de Coomassie (p. ej., RAPIDstain). Métodos de tinción con plata
La electroforesis en gel de poliacrilamida se realizó utilizando glicina-Tris pTT 8.5 0,1 M con 0,5 % (p/v) de Emasol en el depósito. Se utilizaron dos tamaños de tubos de vidrio. Uno tenía 5 mm de diámetro interior y 100 mm de largo. La altura de la columna de gel de poliacrilamida
El método asistido por gel es el más adecuado para las proteínas, porque los péptidos pequeños y más solubles tienden a eluirse de la matriz de gel durante el lavado. En mi laboratorio utilizo columnas de centrifugación de eliminación de detergente Pierce (formato de 0,125 ml), pero hay
Agregue el colorante Coomassie de la suspensión madre de colorante azul Coomassie G-250 al 5 % para obtener una relación detergente/colorante de 8 (gramos/gramo): es decir, para las mitocondrias de levadura, use 1 μl si está usando dodecilmaltósido, 2
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Preparación del gel Prepare y vierta el gel separador: Nota: suficiente para cuatro casetes de minigel Novex de 1,0 mm. Esta receta es para un gel móvil al 12,0 %. En un tubo cónico desechable de 50 ml, mezcle lo siguiente: 12,0 ml de monómero de gel. 10 ml de gel b
El tampón TBE, 10X (pH 8,3), se utiliza para la electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida. Este producto está optimizado para su uso en aplicaciones de ADN. Forma: Líquido transparente e incoloro. Composición: 890 mM de Tris-borato, 890 mM de ácido bórico, 20 mM de EDTA.
Poliacrilamida no iónica 9003-05-8, Se utiliza como floculante para el tratamiento de aguas residuales industriales y para el tratamiento de agua potable, ingrediente auxiliar para el control del perfil de yacimientos petrolíferos y el taponamiento de agua, ingrediente auxiliar para fluido de perforación,
Sistema de gel Tampón de muestra desnaturalizante (concentraciones finales) Preparación de la muestra Tris-glicina Tampón de muestra Tris-glicina SDS: Tris HCl (63 mM), glicerol (10 %), SDS (2 %), azul de bromofenol (0,0025 %), pH 6,8 Calentar las muestras a 85 °C durante 2 a 5 minutos