RESULTADOS Y DISCUSIÓN En la tabla 1 se indican las cantidades de proteínas acopladas a perlas de poliacrilamida-agarosa activadas con glutaraldehído (AcA34) utilizando diversas concentraciones de proteínas y perlas. En las condiciones descritas, se encontró que se fijaban de 0,4 a 2,0 mg de proteínas por ml de gel de poliacrilamida-agarosa.
1. Biochem Biophys Res Commun. 1971 dic 17;45(6):1574-80. Proteínas acopladas a perlas de poliacrilamida utilizando glutaraldehído. Weston PD, Avrameas S.
Se han acoplado varias enzimas a perlas de poliacrilamida con glutaraldehído, y Weston y Avrameas han determinado las condiciones óptimas de activación y enlace. Se utilizó BioGel P300 de 1° menos 400 mallas, y se encontró que un pH de 6,9 era el pH óptimo para la activación con 6% de glutaraldehído.
Proteínas acopladas a perlas de poliacrilamida utilizando glutaraldehído. Biochemical and Biophysical Research Communications 1971, 45 (6) , 1574-1580. DOI: 10.1016/0006-291X(71)90200-2. Leon Wofsy, Paolo Truffa-Bachi, David Naor. ENFOQUES QUÍMICOS PARA EL PROBLEMA DEL RECEPTOR CELULAR*.
Acoplamiento de proteínas a perlas de poliacrilamida activadas Se mezclaron 10 ml de tampón de fosfato 0,1 M pH 7,4 que contenía de 15 a 30 mg de proteína con 10 ml de perlas activadas centrifugadas (3000 g, 10 min, 4) y la suspensión se dejó rotar lentamente a temperatura ambiente durante la noche o, en algunos experimentos, durante 48 h a 4 .
El glutaraldehído posee características únicas que lo convierten en uno de los reactivos de reticulación de proteínas más eficaces. Puede estar presente en al menos 13 formas diferentes dependiendo de las condiciones de la solución, como el pH, la concentración, la temperatura, etc. Se ha encontrado una gran cantidad de literatura sobre el uso del glutaraldehído para la inmovilización de proteínas, pero no hay acuerdo sobre el reactivo principal
La actina se acopló a perlas de poliacrilamida-agarosa activadas con glutaraldehído y las proteínas absorbidas se eluyeron con un tampón de glicina ácida-HCl (Ternynck y Avrameas, 1976). Los resultados obtenidos por EIA fueron
Se ha informado sobre el uso de glutaraldehído como agente de reticulación [11. El presente artículo describe un método en el que los antígenos y los anticuerpos se acoplan a perlas de geles de poliacrilamida activadas con glutaraldehído [2]. Los derivados obtenidos se examinaron para determinar su eficacia en el uso como inmunoadsorbentes.
Aunque la posfijación con GA es un procedimiento de uso común en ensayos de inmunofluorescencia, la reticulación con GA también es bien conocida por su uso para unir proteínas o enzimas a geles de poliacrilamida. 7 Las mediciones correlacionadas de microscopía de localización previa a la expansión y microscopía confocal posterior a la expansión utilizando el tratamiento con GA de células inmunoteñidas revelaron que
Gel de poliacrilamida que contiene proteínas de interés teñidas con tinción compatible con MS: tinción de plata sin glutaraldehído, tinción de Coomassie tradicional (TCS; UNIT 10.6) o tinción de Coomassie coloidal (CCS) Solución de desteñido en gel (consulte la receta específica para cada tipo de gel teñido: tinción de Coomassie coloidal, tinción de plata sin glutaraldehído o tinción de Coomassie tradicional