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¿Qué es la electroforesis en gel de poliacrilamida bidimensional?
La electroforesis en gel de poliacrilamida bidimensional (2D-PAGE) separa las proteínas por sus puntos isoeléctricos (IEP) y movilidades electroforéticas (1). En la primera dimensión, se aplica una muestra a un gel de acrilamida de enfoque isoeléctrico (IEF). Dentro de esto, las proteínas constituyentes migran a través de un gradiente de pH hasta que alcanzan sus IEP.
¿Qué es la electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul?
La electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul (Blue Native PAGE) fue introducida originalmente por Schagger y von Jagow como una técnica para separar complejos de proteínas de membrana enzimáticamente activos en condiciones suaves .
¿Cómo uso un gel de tubo para la electroforesis de segunda dimensión?
Los geles de tubo se pueden usar inmediatamente para la electroforesis de segunda dimensión o almacenar a -70 ° C hasta que se necesiten. Deje los geles de tubo en el tampón de equilibrio. El procedimiento general será el mismo para la mayoría de los equipos. 1. Limpie las placas de vidrio con alcohol. Ensamble las placas de vidrio, los espaciadores (ver Nota 12) y las abrazaderas.
¿Cómo funciona el gel de acrilamida?
En la primera dimensión, se aplica una muestra a un gel de acrilamida de enfoque isoeléctrico (IEF). Dentro de este, las proteínas constituyentes migran a través de un gradiente de pH hasta que alcanzan sus IEP. El IEP de una proteína es el valor de pH en el que no tiene carga neta. Esto se debe a que los aminoácidos con carga positiva y negativa se cancelan entre sí.