Electroforesis para Western blot. La electroforesis se utiliza para separar y analizar macromoléculas en función de su tamaño y carga. Nuestro protocolo de electroforesis incluye la preparación de geles PAGE y controles de carga. Imprima este protocolo.
Luego, las muestras se someten a una electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE), que separa las proteínas según su estructura y punto isoeléctrico (PAGE nativa) o su tamaño (SDS-PAGE). Las proteínas deben tener una carga negativa para migrar
Los geles de poliacrilamida se caracterizan por dos parámetros: concentración total de monómero (%T, en g/100 ml) y porcentaje en peso de reticulante (%C). Al variar estos dos parámetros, se puede optimizar el tamaño de poro del gel para obtener el mejor rendimiento
La electroforesis en gel nativo no se puede utilizar para la estimación del peso molecular. Dado que la migración está influenciada por la estructura, las proteínas del mismo tamaño a menudo se pueden resolver fácilmente. Las muestras secas se pueden disolver directamente en el tampón de muestra. Prefabricado
Electroforesis en gel bidimensional. Geles 2D teñidos con azul de Commassie. La electroforesis en gel bidimensional, abreviada como electroforesis 2-DE o 2-D, es una forma de electroforesis en gel que se utiliza habitualmente para analizar proteínas. Mezclas de proteínas
Use el tampón de gel apilable cuando realice la colada de sus propios geles de proteína de poliacrilamida. Este tampón se utiliza para realizar la colada de la parte de apilamiento de geles SDS o nativos. Productos relacionados Tampón de gel de resolución ()Soluciones y polvos de acrilamida TEMED ()Amonio
Preparar soluciones de gel separador al 4 % (receta 5) y al 15 % (receta 6), añadiendo APS y TEMED inmediatamente antes de su uso. Los volúmenes combinados deben ser iguales al volumen del gel separador. Verter estas soluciones de gel en los cilindros correspondientes
CHAPS (nombre formal: 1-propanosulfonato de 3-colamidopropil dimetilamonio) es un detergente zwitteriónico no desnaturalizante para solubilizar proteínas de membrana y romper interacciones proteína-proteína. Este detergente combina las propiedades útiles de
La electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul (BN-PAGE) es un método de separación con una resolución mayor que la filtración en gel o la ultracentrifugación por densidad de sacarosa que se puede utilizar para analizar
Las soluciones de lisis celular son soluciones tampón y reactivos a base de detergentes que se han optimizado para aplicaciones de lisis celular específicas. Lisis celular y extracción de proteínas eficaces para diferentes especies de organismos y diferentes células y tejidos