detectará tan solo 0,1 µg/banda. 4- Almacene los geles en HOAC al 7 %. Protocolo rápido 1- Fije el gel en IPA al 25 %, HOAC al 10 % en agua durante 30 a 60 minutos. 2- Tiña el gel en ácido acético al 10 % en agua, que contenga 60 mg/L de azul de Coomassie R-250. Las bandas
Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) La SDS-PAGE es un método ampliamente utilizado para analizar y aislar proteínas. Durante la electroforesis, las proteínas se mueven hacia el electrodo positivo y la tasa de migración se presenta
El uso de un detergente zwitteriónico en la electroforesis en gel bidimensional de microsomas de hígado de trucha, 1983, Anal. Biochem., v. 135, 453-455 Schupbach, J., et al., Un método universal para la electroforesis en gel de poliacrilamida bidimensional de
Sumerja las tiras de gel de primera dimensión en 10 % de 2-mercaptoetanol (v/v) o 10 mM de ditioeritritol (p/v) en una placa de Petri de plástico durante 30 minutos a temperatura ambiente, con agitación intermitente. Coloque las tiras empapadas con cuidado sobre el gel de segunda dimensión.
Luego, haga funcionar el gel a 200 V durante 20-25 min (para un gel de resolución de poliacrilamida al 15 %), 40-50 min (para un gel de resolución de poliacrilamida al 18 %), 90-100 min (para un gel de resolución de poliacrilamida al 22 %). NOTA: Es posible que se necesite optimizar un poco el tiempo de funcionamiento a 200 V
Teñido en gel: pasar una fibra hilada en húmedo que se encuentra en la fase de gel (aún no en la cristalinidad u orientación totales) a través de un baño de tinte que contiene un tinte con afinidad por la fibra. Este procedimiento proporciona un acceso eficiente al tinte
La unión se puede lograr utilizando recetas de gel de poliacrilamida estándar y técnicas de polimerización. Los soportes que tienen una alta densidad de superficie de oligonucleótido hibridable (∼200 fmol/mm2) pueden
Protocolo para utilizar la zimografía en gelatina para detectar la actividad de MMP en medios acondicionados. En este procedimiento, las gelatinasas activas digieren la gelatina embebida en un gel de poliacrilamida. Después de la tinción con Coomassie, las áreas de degradación son visibles como bandas claras
10. Inmediatamente después de la transposición, purifique utilizando un kit de purificación de PCR MinElute de Qiagen. 11. Eluya el ADN transpuesto en 10 μl de tampón de elución (tampón EB del kit MinElute que consta de 10 mM de Tris·Cl, pH 8). 12. Almacene el ADN purificado a −20 C si
Los geles de poliacrilamida han servido como una herramienta importante para investigar el efecto de la rigidez del sustrato en las funciones celulares en varios tipos de células desde que Pelham et al. informaron que la motilidad celular y la adhesión focal en fibroblastos están reguladas por