La determinación del peso molecular mínimo por filtración en gel en tampones que contienen NaCl 1,0 M y por electroforesis en gel de disco en dodecil sulfato de sodio arrojó valores de 62.000 y 60.000, respectivamente.
El acoplamiento de IEF con electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia del detergente aniónico dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) en la segunda dimensión resultó en un método 2D que separó las proteínas de acuerdo con dos
**Este protocolo de video se basa en una publicación asociada 1: Electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul (BN-PAGE) para la identificación y análisis de complejos multiproteicos. Mahima Swamy, Gabrielle M. Siegers, Susana Minguet, Bernd
Se realizó una electroforesis en gel de poliacrilamida nativa azul (BN-PAGE) en MpIBP en soluciones de pH variado a una concentración de 0,4 mg/ml para garantizar bandas visibles en el gel.
Este sistema proporciona una resolución fina para moléculas de ARN de menos de 600 nt [28]. En nuestro laboratorio, utilizamos un gel desnaturalizante de urea 8 M/15 % de poliacrilamida, que puede separar moléculas de entre 25 y 150 pb [29].
El procedimiento consiste en una separación en primera dimensión de las proteínas de membrana mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS), seguida de una elución electroforética de las proteínas de este gel, en la segunda dimensión, a través de un
(1992) Colorantes de carga de gel compatibles con PCR. Biotechniques 12, 679–80. Houts, GE et al. (1979) Transcriptasa inversa del virus de la mieloblastosis aviar. J. Virol. 29, 517–22. Hu, CY et al. (1992) Efecto de la congelación del tampón de PCR en la
La separación demorará entre 4 y 5 horas. La cámara de gel debe estar conectada a una unidad de enfriamiento. 3. Después de la separación, remoje el gel durante 1 hora en una solución fijadora (50 % de metanol, 10 % de ácido acético) y luego tiña durante 1 o 2 horas con Serva Blue G al 0,025 % en ácido acético al 10 %
Métodos: El pH del fantasma, que contenía principalmente gel de poliacrilamida (PAG) y albúmina de suero bovino (BSA) como indicador sensible a la temperatura, se ajustó al rango de 4,3-4,7 utilizando el
Los estudiantes adquieren experiencia práctica de principio a fin en la subclonación de un gen en un vector de expresión, a través de la purificación de la proteína recombinante. La segunda edición ha sido completamente reescrita, con nuevos ejercicios de laboratorio y todas las novedades