La ingeniería de tejidos ha unificado dos dominios de investigación independientes, es decir, la ingeniería y el dominio de las ciencias de la vida, que consisten en la anatomía biológica fundamental de los tejidos y células del cuerpo [118–120]. 4.1. Ingeniería de tejidos óseos
La poliacrilamida es un polímero soluble en agua formado por subunidades de acrilamida. Aumenta la viscosidad del agua y facilita la floculación de las partículas presentes en el agua. Seguridad y documentación
Ofrece herramientas moleculares, reactivos biológicos y suministros de laboratorio de alta calidad para laboratorios analíticos, instituciones educativas y de investigación de todo el mundo. Vende anticuerpos de etiqueta, proteínas recombinantes, péptidos bioactivos, medios vegetales y anticuerpos, productos bioquímicos para las industrias de las ciencias biológicas y la biotecnología
El gel 2D obtenido sin irradiación (Figura 3 B, izquierda) corresponde al material biológico recuperado en las perlas de la misma manera que para el carril 3 de la Figura 3 A. Cuando se irradió la suspensión cromatográfica, el sobrenadante contenía solo dos especies moleculares visibles como manchas a aproximadamente 40 kDa y 25 kDa (Figura 3 B, derecha).
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El lisado se centrifugó a 20 000 × g durante 30 min y el sobrenadante se cargó en 2 ml de perlas Nuvia (Bio-Rad) preequilibradas con tampón de sonicación. Las perlas se lavaron con 10 columnas
A continuación, se retiraron las perlas por centrifugación y los sobrenadantes se complementaron con 125 mM de DTT, se calentaron durante 5 minutos a 70 °C y se cargaron en un gel de poliacrilamida con SDS al 12 %. El gel se tiñó con Coomassie y se cortaron las bandas correspondientes en tamaño a BiP para su digestión en gel con endopeptidasa Arg-C y su análisis por espectrometría de masas.
La electroforesis en gel bidimensional (2DGE) es una técnica que puede separar miles de biomoléculas de una mezcla. Esta técnica implica dos métodos de separación distintos que se han combinado: el enfoque isoeléctrico (IEF) y la electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE).
El espesor del gel de poliacrilamida se controló añadiendo un volumen conocido de una mezcla de acrilamida y bis-acrilamida con pequeñas perlas fluorescentes (200 nm; Invitrogen, Eugene, OR) y se midió mediante un microscopio fluorescente equipado con un micrómetro direccional z. Esto se hizo enfocando el microscopio desde la superficie del vidrio hasta el gel.
Los lisados se separaron mediante electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida y se transfirieron durante la noche a 100 mA a una membrana de difluoruro de polivinilideno (Millipore, Bedford, MA, EE. UU.) y se bloquearon